將一根導線插入股動脈（FA）產生了血管內損傷，并檢查了周圍脂肪組織（PVAT）中的炎癥反應。考慮到雌激素對血管系統的顯著影響，研究使用了雄性或去勢雌性小鼠。多種免疫細胞基因在血管損傷后24小時內在PVAT中上調，包括單核細胞-巨噬細胞標記基因Cd11b、Cd11c、Mrc1和Adgre1（F4/80）（圖1a）。免疫組化染色顯示，在損傷后早期階段（3天），F4/80巨噬細胞主要積聚在圍繞血管的外部組織中，這些組織主要由PVAT組成，而不是在血管組織中（圖1b，c）。然后，這些F4/80巨噬細胞在損傷后的晚期（14天）擴散到血管組織中（圖1b，c）。與此同時，TNF（TNF-α）、Serpine1（PAI-1）、Il1a和Il1b等炎癥細胞因子基因的表達在血管損傷后在周圍組織中顯著上調（圖1d）。
對受傷或假手術操作的動脈周圍的特定脂肪組織(PVAT)進行轉錄組分析顯示，除了幾種免疫細胞標志基因和炎癥細胞因子的表達水平增加外，血管損傷引起的BAT標志基因的表達水平顯著增加，包括Ucp1、Cidea、Cox8b、Ppargc1a、Elovl3和Dio2，這通過實時定量反轉錄聚合酶鏈反應(qRT-PCR)分析得到了證實（圖1e）。通過原位雜交分析（圖1f）和免疫組織化學分析（圖1g, h）確認了血管損傷后PVAT中UCP1的上調。形態學上，與假手術后的脂肪細胞相比，血管損傷后的PVAT中的脂肪細胞具有米色/棕色脂肪特征，包括更小的細胞大小和多房脂滴（圖1g, i）。WB印跡分析也顯示在去除血管的外部組織中UCP1的增加，而不是保留的動脈（圖1j）。然后，我們檢查了浸潤的巨噬細胞在UCP1上調中的作用。通過給予荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑氯膦酸脂質體清除巨噬細胞后，顯著減輕了血管損傷后的UCP1上調（圖1k, l）。卵巢切除術對BAT標志物如Ucp1和Elovl3的表達水平影響有限，而血管損傷后這些標志物的上調在卵巢切除小鼠中比對照組更為明顯（補充圖1b）。在完整的生殖腺雄性小鼠中觀察到血管損傷后UCP1顯著上調及脂肪細胞細胞大小的形態學縮小（補充圖1c, d）。綜上所述，這些結果表明，在雌性卵巢切除小鼠和雄性小鼠中，血管損傷引發巨噬細胞浸潤PVAT，誘導PVAT轉變為BAT樣表型，類似于在寒冷或β3AR激動劑的影響下觀察到的皮下和內臟WAT的“變色"現象。
股動脈外層組織巨噬細胞清除方案和免疫組化檢測效果解決方案：
給藥劑量：200ul/小鼠
注射方式：腹腔注射
時間點：建模當天Day1和Day7， 一共兩次
檢測手段：IHC，見圖K和I。
樣本：股動脈外層組織
論文信息：
論文題目：Beiging of perivascular adipose tissue regulates its inflammation and vascular remodeling
期刊名稱：Nature Communications
時間期卷：13, Article number: 5117 (2022)
在線時間：2022年9月7日
DOI：doi.org/10.1038/s41467-022-32658-6
產品信息：
貨號：CP-005-005
規格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
產地：荷蘭
名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes
辦事處：Target Technology(靶點科技)
ClodronateLiposomes氯膦酸鹽二鈉脂質體清除單核巨噬細胞，在血管損傷誘導的炎性模型中單核巨噬細胞功能研究，荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：周圍血管脂肪組織的肥大調節其炎癥和血管重塑。
